Качественные методы исследования фекалий на яйца гельминтов. Микроскопическое исследование испражнений

Методы исследования гельминтов

Качественные методы исследования фекалий на яйца гельминтов. Микроскопическое исследование испражнений

Методылабораторной диагностики гельминтозов

Копрологическиеисследования (исследования кала) вдиагностике гельминтозов имеют большоезначение, так как многие гельминтыпаразитируют в кишечнике или органахс ним связанных, а яйца их выделяются сиспражнениями.

Испражненияисследуются двумя методами:

1. Макроскопический– обнаруживают гельминтов, их головки,членики, обрывки стробилы. Небольшиепорции кала, перемешивают с водой вплоской ванночке или чашке Петри ипросматривают при хорошем освещениина темном фоне, при необходимостипользуясь лупой. Все подозрительныеобразования пинцетом переносят в другуючашку с водой или на предметное стеклов каплю разведенного глицерина.

При методе отстаивания исследуемую порцию фекалий размешиваютс водой в стеклянном цилиндре, послеотстаивания сливают верхний слой воды.Так повторяют несколько раз. Когдажидкость станет прозрачной ее сливают,а осадок просматривают в чашке Петри.

2. Микроскопический– для обнаружения яиц и личинокгельминтов. Существует много методовисследования.

1). Нативныймазок– наиболее распространенный и техническидоступный метод исследования. Можнообнаружить яйца и личинки всех гельминтов.Однако, при небольшом количестве яицих не всегда удается найти. Поэтомуиспользуется метод обогащения.

1). МетодФюллеборга– это метод обогащения, основан навсплытии яиц гельминтозов в насыщенномрастворе NaCl (1,2 – плотность; 400 г NaClна 1 литр воды; 40% раствор NaCl).Метод более эффективен, чем нативныймазок.

В стеклянные банки помещают 2-5 гфекалий и заливают раствором NaCl,размешивают и через 45 минут снимаютобразовавшуюся пленку металлическойпетлей, помещают каплю глицерина напредметное стекло. Исследуют подмикроскопом.

Недостаток метода –замедленное высплывание яиц различныхгельминтов, карликовый цепень –через15-20 минут, аскарид – 1,5 часа,власоглав – 2-3 часа.

2) МетодКалантарян– также метод обогащения, но применяетсянасыщенный раствор NaNO3(1,38 плотность). Большинство яиц всплывает,не требуется исследования осадка.Недостаток – длительное выдерживаниеяиц в растворе, приводит к тому, чтонекоторые яйца начинают набухать иоседать на дно, исчезая с поверхностнойпленки.

3. МетодГорячева– основан на принципе осаждения яиц,обнаружения мелких яиц трематод. Вкачестве раствора используют насыщенныйраствор NaClи сверху осторожно наслаивают 3-4 млраствора фекалий. Через 15-20 часов яйцатрематод оседают на дно. Жидкостьсливают, осадок на предметное стекло ипод микроскоп.

4. Методзакручивания по Шульману– дляобнаружения в кале личинок гельминтов.Исследуют только свежевыделенныефекалии. 2-3 г помещают в стеклянную банкуи приливают 5-кратное количество воды,быстро размешивают палочкой, не касаясьстенок банки – 20-30 минут, затем палочкубыстро вынимают, и каплю жидкости наконце переносят на предметное стеклои микроскопируют.

5. Метод Бермана– основан на способности, личинокгельминтов мигрировать, по направлениюк теплу, и служит для выявления их вфекалиях.

6. Метод Харадаи Мори(методвыращивания личинок) и рекомендуетсядля исследования на анкилостомитозы.Метод основан на том, что в тепле и навлажной фильтрованной бумаге из яицанкилостомид развиваются филяриевидныеличинки, которые легко можно обнаружить.

На середину полоски фильтрованнойбумаги наносят 15 г кала, бумагу с фекалиямипомещают в банку, так, чтобы нижний конецбыл погружен в воду, а верхний закрепленпробкой. Банку выдерживают в термостате280Св течение 5-6 дней. Филяриевидные личинкиразвиваются за это время и спускаютсяв воду. Жидкость исследуют под лупой.

Если трудно обнаружить, жидкостьцентрифугируют, убив предварительноличинок нагреванием до 600.Лаборант должен работать в перчатках.

7. Методы наэнтеробиоз– выявление яиц острицы и бычьего цепня.

а) соскоб сперианальных складок– ватным тампоном, туго намотанным надеревянную палочку и смоченную 50%раствором глицерина. В лабораториитампон смывают 1-2 каплями 50% воднымраствором глицерина.

б) метод липкойлепты (метод Грэхэма)

Липкую лентуприкладывают к перианальным складкам,затем липким слоем к предметному стеклуи микроскопируют.

В) соскоб спомощью глазных палочек (метод Рабиновича).Для перианального соскоба используютстеклянные глазные палочки, широкаячасть которых покрывается специальнымклеем, что позволяет удерживать яйцаостриц.

Исследованиекрови, желчи, мокроты и мышц

  1. Микроскопия крови – обнаруживают личинки филярий.

  2. Исследование дуоденального содержимого и желчи. Яйца и личинки гельминтов паразитирующих в печени, желчном пузыре, поджелудочной железе (описторхоз, фасциолез, дикроцелилз) и двенадцатиперстной кишке (стронгилоидоз).

  3. Исследование мокроты – яйца параганима, личинки аскариды, некатора, стронгилоида, элементы эхинококкового пузыря.

  4. Исследование мышц – при подозрении на трихинеллез исследуют мышцы больного или трупа, а также мясо, предположительно послужившего причиной заражения человека. С целью трихинеллоскопии мышцу разрезают на мелкие кусочки и помещают в компрессорий, это два широких, толстых стекла, которые раздавливают мышцы и личинки трихинеллы обнаруживаются в виде капсул – метод компрессии.

Метод переваривания– мышцы заливают искусственным желудочнымсоком (раствор соляной кислоты и пепсин).Мышцы перевариваются, а личинки легко выявляются. Определение интенсивностиинвазии: количество личинок до 200 на 1 г мышечной ткани – умеренная интенсивностьинвазии; до 500 – интенсивная; свыше 500 –сверхинтенсивная инвазия.

Серологическиеметоды

Серологическиеметоды исследования (выявление антителв сыворотке крови) используются длядиагностики трихинеллеза, эхинококкоза,альвеококкоза, цистицеркоза и рядадругих гельминтов.

Эти методы особоценны, когда наличие паразита в организмедругими более доступными путями доказатьне удается.

Следует учитывать, чтосерологические реакции не являютсяабсолютным показателем наличия илиотсутствия паразита, что обусловленои состоянием иммунитета и спецификойтой или иной реакции.

Источник: https://studfile.net/preview/2362142/

Как сдавать анализ кала на гельминты и их яйца?

Качественные методы исследования фекалий на яйца гельминтов. Микроскопическое исследование испражнений

Гельминты (в просторечии глисты) – это собирательное название для паразитических червей, живущих в организме человека, животных и растений. Заболевания, вызванные гельминтами, называются гельминтозы (аскаридоз, энтеробиоз, стронгилоидоз).

Анализ кала на гельминты и их яйца – это исследование с целью обнаружения паразитов (глистов) в кишечнике. При их выявлении назначается специфическое лечение. Проведение анализа предполагает микроскопическое изучение биоматериала.

Профосмотр

Исследование кала на гельминтов проводится в следующих случаях:

  • проведение диспансерного обследования;
  • при госпитализации в стационар;
  • оформление детей в учреждения дошкольного и школьного образования;
  • выписке справок для посещения бассейна;
  • оформление медицинской книжки;
  • подтверждение предполагаемой по жалобам пациента глистной инвазии.

Симптомы

Анализ назначается при следующих симптомах:

  • ухудшение аппетита;
  • расстройства пищеварения (метеоризм, запоры);
  • обнаружение слизи и крови в фекалиях;
  • ощущение зуда, который усиливается к вечеру, около анального отверстия;
  • снижение массы тела;
  • чувство постоянной усталости;
  • скрежет зубами.

Имеются ли у вас глисты? – Пройти онлайн-тест из 10 вопросов

Оценка эффективности лечения гельминтозов

Кал также исследуется для оценки эффективности лечения паразитозов. Для определенных патологий есть свой период, по истечении которого назначается повторный анализ:

  • для геогельминтозов – 1 месяц;
  • для биогельминтозов – 3 месяца;
  • для гименолепидоза – 1 месяц; 6 месяцев, в случае затяжного течения патологии – еще и 12 месяцев;
  • для энтеробиоза – 4-6 дней (перианальный соскоб);
  • для стронгилоидоза – через 1 месяц назначается исследование содержимого 12-перстной кишки.

Рекомендуем почитать:

Как выполняется анализ кала на энтеробиоз (острицы)?

Подготовка

Подготовка к анализу необходима для обеспечения достоверности результата. Правила подготовки следующие:

  • за неделю до сдачи кала нужно прекратить прием антимикробных препаратов, противодиарейных средств, касторового масла;
  • за неделю до исследования перестать применять ректальные суппозитории;
  • если пациент проходил процедуру ирригоскопии, то анализ можно сдавать только спустя две недели после нее.

Тара для анализа

В подготовке тары для кала имеется два варианта:

  1. Купить контейнер в аптеке. В любой аптеке продаются специальные тары для анализа кала, которые оснащены лопаткой. Такой вариант является предпочтительным, поскольку гарантирует стерильность поверхности.
  2. Приготовить стеклянную тару самостоятельно. Необходима стеклянная тара небольшого размера с завинчивающейся крышкой. Чтобы добиться стерильности банки, нужно сначала тщательно вымыть ее, прокипятить. После кипячения тару оставляют сушиться.

Забор биоматериала

  • сбор биоматериала рекомендуется проводить в утренние часы, после чего нужно в максимально короткие сроки (не более чем за 4-5 часов) доставить емкость в лабораторию;
  • количество биоматериала, достаточное для анализа – примерно 2 чайные ложки;
  • кал следует собирать с разных участков фекалий – сбоку, изнутри, сверху;
  • в биоматериале не должно быть посторонних примесей (например, нужно следить, чтобы в емкость не попала моча).

Хранение анализа

Контейнер необходимо подписать и доставить в лабораторию вместе с направлением в максимально короткие сроки.

Максимальный период времени, на протяжении которого пробы могут храниться в закрытых контейнерах в холодильнике при +4 – +8 °C составляет 8 часов. Результат исследования отправляется врачу в этот же день.

Диагностический тест проводится в день поступления биоматериала в лабораторию.

Расшифровка показателей

В здоровом состоянии в кале не должно быть гельминтов и их яиц. При выявлении паразитов в обязательном порядке назначается лечение.

Однократное проведение исследования не всегда выявляет паразитов в фекалиях даже при их присутствии в организме. Для обеспечения точности анализа его следует повторить еще несколько раз (минимум один раз, но чаще – дважды) выдерживая интервал в 1-3 суток.

Проведение исследования

Анализ представляет собой прямой метод микроскопического обнаружения гельминтов, их фрагментов и яиц. Также в ходе проведения теста могут быть обнаружены цисты или вегетативные формы простейших.

Если в кале выявляют какого-либо паразита, нет необходимости в подтверждающих диагностических тестах.

Вид гельминта определяется согласно его морфологическим особенностям.

После проведения исследования лаборатория отправляет результаты к лечащему врачу. Специалист в зависимости от полученных данных принимает решение о необходимости лечения.

Если подтвердился какой-либо из гельминтозов, то назначается курс терапевтической коррекции с обязательным лабораторным контролем эффективности.

Только после получения отрицательных результатов анализа на гельминты и их яйца специалист подтверждает, что наступило выздоровление.

Особенности результатов анализа в зависимости от вида гельминтоза

Важно знать некоторые особенности, которые определяются видом гельминтоза:

  1. Аскаридоз. Изучение кала под микроскопом позволяет обнаружить яйца паразитов, если проходит кишечная стадия патологии.
  2. Энтеробиоз. Гельминты и их яйца обнаруживаются при исследовании перианального соскоба. Данный анализ проводят три раза, выдерживая интервал от 3 до 7 дней.
  3. Стронгилоидоз. Если паразита обнаружили в кале, то проводится курс терапии, эффективность которого определяется только при отсутствии гельминта в дуоденальном содержимом.

Тактика терапии гельминтозов

Основу терапевтической коррекции при обнаружении гельминтов или их яиц в фекалиях составляют дезинтоксикация.

Коррекции гельминтозов предполагает такие рекомендации:

  • При аскаридозе и энтеробиозе могут быть назначены Пирантел, Мебендазол, Альбендазол, Карбендацим. Лечение назначается для всех членов семьи или коллектива. Обязательно проведение гигиенических процедур. Обычно назначается повторное лечение спустя 10 суток после первичного.
  • При стронгилоидозе назначают Ивермектин.

В случае необходимости может быть назначена дополнительная медикаментозная терапия по усмотрению лечащего врача.

В случае тяжелого течения или для предупреждения гиперчувствительности к некоторым сильным средствам могут быть назначены глюкокортикостероидные препараты.

При обнаружении паразитов в испражнениях важно пройти полный курс терапевтической коррекции. Лечение считается успешным, если исчезли клинические симптомы патологии и повторный анализ дал отрицательный результат.

Источник: https://ProKishechnik.info/obsledovaniya/analiz-kala-na-gelminty.html

Анализ кала на яйца гельминтов

Качественные методы исследования фекалий на яйца гельминтов. Микроскопическое исследование испражнений

[02-010] Анализ кала на яйца гельминтов

340 руб.

Это микроскопическое исследование кала, целью которого является выявление яиц гельминтов (глистов). Анализ позволяет диагностировать наиболее часто встречающиеся гельминтозы, такие как аскаридоз, анкилостомоз, некаториоз и др.

Синонимы русские

Анализ кала на простейшие, яйца глистов.

Синонимыанглийские

Ova and Parasite Exam, O&P, PRO stool, helminth eggs.

Метод исследования

Микроскопия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Кал.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.) и на окраску кала (железа, висмута, сернокислого бария), в течение 72 часов до сдачи кала.

Общая информация об исследовании

Анализ кала на яйца гельминтов – это микроскопическое исследование, используемое для обнаружения паразитов, инфицировавших нижние отделы пищеварительного тракта, откуда они и попадают в стул.

На предметном стекле делается тонкий мазок кала, который затем окрашивается, после чего паразиты и/или их яйца могут быть обнаружены и определены под микроскопом квалифицированным лаборантом.

Существует множество паразитов, способных инфицировать человека. Каждый тип имеет специфический жизненный цикл, процесс созревания и может жить как в одном, так и в большем количестве хозяев.

Некоторые, прежде чем инфицировать человека, проводят часть жизни в промежуточных хозяевах, таких как овцы, коровы, улитки. Большинство имеют более одной формы развития, у некоторых есть личиночная фаза, которая является промежуточной между яйцом и зрелой формой.

Яйца некоторое время могут существовать в окружающей среде вне хозяина и сохранять способность к инфицированию.

Большинство людей заражается через пищу. Яйца и паразиты выделяются со стулом инфицированного человека или животного и могут затем попасть в воду или продукты.

Паразитарная инфекция особенно опасна для определенных групп людей: детей, пожилых, пациентов с ослабленной иммунной системой, например, ВИЧ-инфицированных. У них заражение паразитами может приводить к серьезным осложнениям.

Самые частые признаки паразитарной инфекции: продолжительная диарея, кровь и слизь в стуле, боль в животе и тошнота. У некоторых возникают головные боли и лихорадка, у других симптомов может быть мало или они вообще могут отсутствовать. Диарея продолжительностью дольше нескольких дней грозит потерей веса, обезвоживанием и дисбалансом электролитов.

Особенно велика вероятность заражения у тех, кто путешествует в развивающиеся страны, где теплый климат и система очистки питьевой воды неэффективна.

Глистов, способных поразить пищеварительный тракт и другие части тела, очень много: анкилостомы, трематоды, аскариды, лентецы, острицы, трихинеллы, кошачьи сосальщики – лишь некоторые из них.

Туристы обычно инфицируются через употребление пищи, содержащей яйца паразитов, но некоторые паразиты могут проникать через кожу, например через ступни, когда человек ходит босиком.

Для чего используется исследование?

  • Для выяснения причины продолжительной диареи – чтобы определить, есть ли паразиты в нижних отделах пищеварительного тракта, и, если есть, идентифицировать их. Поскольку существует много других причин диареи, данный анализ часто назначается вместе с другими тестами, такими как посев кала, который позволяет обнаружить болезнетворные бактерии в стуле.
  • Для контроля эффективности антипаразитарной терапии.

Когда назначается исследование?

  • Если человек недавно употребил ручьевую или озерную воду, контактировал с тем, кто инфицирован паразитами, выезжал в развивающиеся страны.
  • В случае диагностированной паразитарной инфекции – для контроля за эффективностью лечения.
  • При подозрении, что человек принял загрязненную воду или пищу, о чем свидетельствуют такие симптомы, как:
    • продолжительная диарея;
    • боль в животе,
    • тошнота, рвота,
    • кровь, слизь в стуле.

Что означают результаты?

Референсные значения

ПоказательРеференсные значения
Diphhyllobothrium latumНе обнаружены
Ascaris lumbricoides
Trichocephalus trichiurus
Thominx aerophilus
Ancylostomatidae genus sp.
Fasciola hepatica
Schistosoma mansoni
Schistosoma japonicum
Schistosoma haematobium
Taeniidae genus sp.
Hymenolepis nana
Opisthorchis felineus
Trichostrongylidae sp.
Dicrocoelium lanceatum

Если яиц гельминтов не обнаружено, причину диареи следует искать в чем-то другом. С другой стороны, в тестируемой пробе может быть слишком мало паразитов для выявления. Для подтверждения результата тест назначается повторно.

Если паразит выявлен, диагностируется паразитарная инфекция. Яйца и паразиты в пробе идентифицируются и подсчитываются.

Обычно у пациента только один вид паразитов, вызвавших симптомы, но их может быть больше.

Некоторые примеры кишечных гельминтов, которые могут быть обнаружены с помощью данного анализа:

  • круглые черви (аскариды и стронгилоиды),
  • анкилостомы,
  • ленточные черви (Hymenolepis nana, Taenia solium and Diphyllobthrium latum),
  • плоские черви и трематоды (Fasciolopsis buski).

Тип лечения и его продолжительность будут зависеть от вида паразита и общего состояния здоровья пациента. Количество организмов может дать врачу информацию о тяжести инфекции.



Также рекомендуется

  • Анализ кала на цисты простейших
  • Giardia lamblia, антиген

Кто назначает исследование?

Терапевт, педиатр, гастроэнтеролог, инфекционист.

Источник: https://helix.ru/kb/item/02-010

Исследование испражнений

Качественные методы исследования фекалий на яйца гельминтов. Микроскопическое исследование испражнений

Исследование испражнений

Простые методы

Макроскопический метод. При осмотре фекалий можно обнаружить гельминтов, их головки, членики, обрывки стробилы, выделяющиеся самостоятельно или после дегельминтизации. Этот метод особенно рекомендуется для выявления энтеробиоза, тениоза и тениаринхоза.

Небольшие порции кала перемешивают с водой в плоской ванночке или в чашке Петри и, просматривая при хорошем освещении на темном фоне, при необходимости пользуясь лупой, извлекают гельминтов и все подозрительные образования белого цвета пинцетом или пипеткой. Собранное переносят в другую чашку с водой или на предметное стекло в каплю разведенного глицерина или изотонического раствора хлорида натрия для дальнейшего изучения.

При методе отстаивания всю исследуемую порцию фекалий следует размешать с водой в стеклянном цилиндре, затем осторожно слить верхний слой воды. Так повторяют несколько раз. Когда жидкость станет прозрачной, ее сливают, а осадок просматривают небольшими порциями в стеклянной ванночке или чашке Петри, как было указано выше.

Микроскопические методы – основной способ исследования фекалий для обнаружения яиц или личинок гельминтов. Различные методы исследования описаны ниже. С целью повышения достоверности обследования анализы могут быть повторены несколько раз ежедневно или с промежутком в 1-3 дня.

Метод нативного мазка. Нативный мазок – наиболее распространенный и технически доступный метод исследования фекалий. В нативном мазке можно обнаружить яйца и личинки гельминтов всех видов. Однако при небольшом числе яиц в испражнениях их не всегда удается найти.

Поэтому исследование кала только при помощи нативного мазка не является полноценным и должно дополняться методами обогащения.

Эффективность исследования нативного мазка заметно повышается при просмотре четырех препаратов, приготовленных из пробы кала на двух предметных стеклах без покрытия покровными стеклами, что позволяет исследовать в общей сложности примерно такое же количество кала, как и по методу Като (см. ниже).

Небольшое количество (величиной со спичечную головку) размешанного кала тонко размазывают деревянной палочкой на поверхности предметного стекла в капле 50%-го раствора глицерина. Обычно на одном стекле готовят два мазка. Мазок просматривают под малым увеличением микроскопа (об. 8, ок. 7). В сомнительных случаях его накрывают покровным стеклом и исследуют под большим увеличением (об. 40).

Для приготовления большого нативного мазка 200-300 мг кала (размером с крупную горошину) растирают на стекле размером 6х9 см в 15-20 каплях 50%-го водного раствора глицерина. Просматривают под бинокулярным стереоскопическим микроскопом (об. 4, ок. 12,5 или об. 2, ок. 17) в проходящем свете без покровных стекол.

В сомнительных случаях можно переводить объектив на большее увеличение. В таких мазках хорошо видны окрашенные крупные яйца гельминтов, несколько хуже – прозрачные яйца карликового цепня. Для обнаружения мелких яиц этот метод непригоден.

Вместе с тем большой объем исследуемого материала и большое поле зрения при высокой глубине резкости обеспечивают значительную эффективность указанной модификации по сравнению с обычным нативным мазком.

Толстый мазок с целлофаном (метод Като) более эффективен, чем изучение нативного мазка, но также требует сочетания с методами обогащения. Выявляются яйца всех видов гельминтов, однако с целью обнаружения яиц карликового цепня (яйца прозрачные) или описторха (мелкие яйца) лаборант должен быть особо внимательным, чтобы их не пропустить (рис.21).

Метод основан на обнаружении яиц гельминтов в толстом мазке кала, просветленном глицерином и подкрашенном малахитовым зеленым. Предварительно гидрофильный целлофан нарезают пластинками размером 20 х 40 мм и погружают в смесь Като (6 мл 3%-го водного раствора малахитового зеленого, 500 мл глицерина, 500 мл 6%-го раствора фенола).

3-5 мл смеси хватает на 100 пластинок, которые готовы к использованию через сутки и могут храниться в этой же смеси в хорошо закрытой посуде при комнатной температуре в течение 6 мес.

При отсутствии малахитового зеленого (рекомендуется для уменьшения утомляемости глаз лаборанта) и фенола (дезинфицирующее средство) можно пользоваться только 50%-м водным раствором глицерина, эффективность исследования не снижается.

Рис. 20. Методика приготовления толстого мазка кала с целлофаном по Като

100 мг испражнений наносят на предметное стекло, покрывают обработанной, как указано выше, пластинкой целлофана и придавливают резиновой пробкой так, чтобы испражнения не растекались из-под целлофана.

Микроскопирование при малом или большом увеличении микроскопа проводят не позже, чем через 1 час (в жаркую погоду – 30-40 мин) после приготовления мазка.

Причиной непрозрачности препарата могут быть толстый слой фекалий, плохая обработка пластинки в смеси Като, недостаточный срок выдержки препарата под целлофаном. Длительное просветление глицерином и чрезмерное высыхание препарата также затрудняют обнаружение яиц.

Метод закручивания по С.С. Шульману. Метод предложен для обнаружения в кале личинок гельминтов, в первую очередь стронгилоида.

Исследуют только свежевыделенные фекалии, 2-3 г которых переносят в стеклянную банку, размешивают стеклянной палочкой круговыми движениями с 3-5-кратным количеством физиологического раствора, не касаясь стенок сосуда. Яйца и личинки гельминтов скапливаются в центре.

После окончания перемешивания каплю на конце палочки быстро переносят на предметное стекло, закрывают ее покровным стеклом и исследуют под микроскопом.

Методы обогащения. Методы обогащения основаны на разности удельного веса яиц и применяемого солевого раствора, что позволяет обнаружить их небольшое количество. Если удельный вес яиц больше удельного веса жидкости, то яйца концентрируются в осадке, который исследуют под микроскопом.

Этот метод седиментации (осаждения) применяют для яиц трематод. При большем удельном весе раствора яйца всплывают на поверхность жидкости, и тогда исследуют пленку. Это методы флотации (всплывания), они наиболее эффективны для обнаружения яиц анкилостомид, власоглава и карликового цепня.

Методы флотации.

Метод Фюллеборна основан на всплывании яиц гельминтов в насыщенном растворе хлорида натрия, имеющем высокую относительную плотность (1,2), что дает возможность выявления яиц при небольшом их количестве.

Метод более эффективен, чем изучение нативного мазка, хотя и сложнее. Достоинствами метода являются дешевизна и доступность. Рекомендуется сочетать изучение нативного мазка и метода Фюллеборна.

Насыщенный раствор готовят, растворяя 400 г хлорида натрия в 1 л воды при кипячении. Относительная плотность раствора 1,18-1,22. Раствор хранят в закрытой бутыли. Для проведения анализа в банку объемом 30-50 мл помещают 2-3 г испражнений и при помешивании палочкой доливают почти доверху насыщенный раствор хлорида натрия. Полоской бумаги быстро удаляют всплывшие крупные частицы.

Через 45-60 мин. отстаивания проволочной петлей снимают поверхностную пленку и переносят ее на предметное стекло в каплю 50% водного раствора глицерина. Вместо снятия пленки петлей можно долить раствор в банке доверху, накрыть предметным стеклом, к поверхности которого пристают всплывшие яйца. Готовят несколько препаратов.

Дополнительно просматривают 2-4 препарата из осадка, набирая его глазной пипеткой на 2 предметных стекла. Помимо поверхностной пленки, необходимо обязательно исследовать также и осадок, поскольку яйца трематод, тениид, неоплодотворенные яйца аскарид не всплывают в данном растворе. Яйца ряда гельминтов всплывают в соленом растворе не сразу.

Так, если максимальное число яиц карликового цепня всплывает через 15-20 мин, то аскарид – через 1,5-2 ч, власоглава – через 2-3 ч.

Таким образом, к достоинствам этого метода относится его дешевизна и доступность, к недостаткам – необходимость просмотра препаратов на поверхностной пленки и осадка, а также длительность отстаивания.

Метод Е. В. Калантарян также является методом обогащения, но более эффективен и проще, чем метод Фюллеборна. Применяется насыщенный раствор нитрата натрия с относительной плотностью 1,38. Поэтому яйца большинства гельминтов всплывают и обнаруживаются в поверхностной пленке, исследование осадка не требуется.

Для приготовления насыщенного раствора нитрата натрия 1 кг соли нитрата натрия (натриевой селитры) растворяют в 1 л воды и кипятят до полного растворения и образования на поверхности пленки. Без фильтрования переливают в сухую бутыль.

При отсутствии нитрата натрия его можно заменить нитратом аммония (аммиачная селитра), растворяя 1,7 кг на 1 л воды.

Относительная плотность полученного раствора 1,3, что несколько снижает эффективность по сравнению с раствором нитрата натрия.

Достоинства метода: быстро всплывают и обнаруживаются в поверхностной пленке яйца большинства гельминтов, что исключает необходимость исследования осадка.

Недостатками метода являются дефицит нитрата натрия, а также то, что яйца трематод, онкосферы тениид не всплывают и остаются в осадке.

Необходимо учитывать, что при длительном (более 1 -2 ч) выдерживании фекалий в растворе яйца некоторых гельминтов начинают набухать и оседают, исчезая из поверхностной пленки.

Методы седиментации

Метод П. П. Горячева основан на принципе осаждения яиц. Мазок в этом случае получается светлый, без грубой примеси, что облегчает обнаружение мелких яиц трематод (описторха и др.). Удельный вес яиц описторха высок, поэтому они не всплывают в солевых растворах.

В цилиндр диаметром 2-3 см наливают 70-100 мл насыщенного раствора хлорида натрия.

Отдельно тщательно размешивают 0,5 г испражнений в 20-25 мл воды и осторожно фильтруют через воронку с двумя слоями марли в цилиндр на солевой раствор, избегая перемешивания (так, чтобы образовалось два четко разграниченных слоя).

Через 2-3 часа верхний слой с калом отсасывают пипеткой, а оставшийся солевой раствор оставляют стоять на 12-20 часов или центрифугируют. Осадок пипеткой переносят на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и микроскопируют.

Метод Горячева был предложен для обнаружения яиц описторха и оказался эффективнее, чем исследование нативного мазка и метод Фюллеборна. В настоящее время для диагностики описторхоза (клонорхоза) рекомендуют методы Като и Калантарян, как достаточно эффективные и технически более простые.

Метод Красильникова. Под действием поверхностно-активных веществ, входящих в состав моющих средств (детергентов), яйца гельминтов освобождаются от испражнений и концентрируются в осадке.

Предварительно готовят 1%-й раствор стирального порошка «Лотос». Для этого 10 г порошка растворяют в 1 л водопроводной воды. При отсутствии «Лотоса» можно использовать и другие стиральные порошки, но каждого из них нужно брать столько, сколько растворится без образования осадка в 1 л водопроводной воды.

В стеклянный сосуд емкостью 30-50 мл наливают 20-30 мл раствора детергента, туда же помещают небольшую порцию испражнений и хорошо перемешивают. Соотношение испражнений и раствора должно быть примерно 1:20. Испражнения должны находиться в растворе не менее суток.

За это время на дне образуется осадок из 2-3-х слоев. Нижний слой состоит из грубых тяжелых частиц, в среднем слое собираются яйца гельминтов, верхний слой представляет собой беловато-серые хлопья. Затем пипеткой набирают 2-3 капли жидкости из среднего слоя и переносят на предметное стекло.

На одном стекле готовят 2 препарата, накрывают покровным стеклом и микроскопируют.

Метод Красильникова позволяет обнаружить яйца всех видов гельминтов, выделяемые с испражнениями.

Эфир-формалиновый метод седиментации и химикоседиментационный метод при высокой эффективности весьма трудоемки, особенно при массовых обследованиях, в связи с этим целесообразнее использовать эфир-уксусный метод.

Он позволяет после дополнительной обработки осадка химреактивами получить в нем практически только яйца гельминтов, что облегчает выявление мелких яиц трематод.

Этот метод оказался универсальным, выявляющим яйца всех кишечных гельминтов, цисты кишечных простейших, он также может использоваться для количественной оценки интенсивности инвазии.

В центрифужные градуированные пробирки наливают 7 мл 10%-го раствора уксусной кислоты и добавляют 1 г фекалий до отметки 8 мл.

Фекалий и тщательно перемешивают палочкой до образования однородной смеси, а затем процеживают через два слоя марли в другую центрифужную пробирку (чтобы в новой пробирке процеженного раствора снова было 8 мл, если меньше, то дополнительно можно ополоснуть 10% раствором уксусной кислоты воронку с бинтом, через которые процеживали раствор фекалий). В эту пробирку добавляют 2 мл эфира (до метки 10 мл), закрывают пробкой и энергично встряхивают в течение 30 сек. Смесь центрифугируют при 3000 об/мин в течение 1 минуты (или 2 минуты при 1500 об/мин). Слой коагулянта (в виде пробки в верхней части пробирки) палочкой отделяют от стенок пробирки и вместе с надосадочной жидкостью осторожно сливают. Осадок (как правило, небольшой, бесцветный) наносят на предметные стекла пипеткой, накрывают покровным стеклом и микроскопируют.

Подробности Раздел: Паразитология и природная очаговость болезней

Источник: http://ZooVet.info/vet-knigi/117-parazytologiya/ochagi-bolezney/6896-issledovanie-isprazhnenij

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.